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안녕하세요
물리화학적 성질 분석 및 성분 분석 가능 여부 문의드립니다. 물리화학적 성분 아래 내용에서 어떤 것들이 평가 가능할까요? 돼지태반 추출물은 분말 상태로 되어있습니다.
식약처 화장품 위해평가 보고서 작성을 위해 물리 화학적 성질 데이터가 필요합니다. [물질명, IUPAC명, CAS No., 화학식, 분자량, 순도(분석방법), 구조식, 물리적 성상, 녹는점, 끓는점, 밀도, 용해도, Log Pow, 헨리상수, 동의어] 성분분석 의뢰 내용은 다음과 같습니다. 전처리도 해주시는지 궁금합니다. 구체적 HPLC 분석 조건(컬럼/용매/검출기) 및 논문별 분리 크로마토그램 사례
✅ 1️Polyamines (Spermidine, Spermine)
🔬 HPLC 분석
조건 (대표)
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항목
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조건
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컬럼
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C18 역상 컬럼 (ex:
Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18, 4.6 × 150 mm, 5 μm)
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이동상(Mobile Phase)
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A: 50 mM KH₂PO₄ (pH 6.8) + 5% ACN
B: ACN:MeOH:Water (45:45:10)
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그라디언트
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0–10 min: 10% B → 70% B (선형)
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유속 (Flow rate)
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1.0 mL/min
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주입량
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20 μL
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검출기
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FLD (형광 검출, ex:
Ex 340 nm / Em 445 nm)
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파생화 시약
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OPA (Ortho-Phthalaldehyde), FMOC-Cl
(Fluorenylmethyloxycarbonyl chloride)
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전처리
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시료 내 polyamine은
OPA/FMOC로 유도체화 (15분 반응) 후
주입
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🔖 문헌
예시
- Wu G. et al. Biology of
Reproduction (2005).
→ 돼지 태반 Proline → Putrescine/Spermidine 전환 경로
확인.
✅ 2️⃣ Retinol (비타민 A)
🔬 HPLC 분석
조건 (대표)
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항목
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조건
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컬럼
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C18 역상 컬럼 (Waters
Symmetry C18, 4.6 × 250 mm, 5 μm)
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이동상
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MeOH:Water (95:5, v/v) + 0.1% BHT (산화
방지)
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유속
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1.0 mL/min
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주입량
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20 μL
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검출기
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UV 검출 (λ = 325
nm)
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전처리
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헥산:EtOH 추출 → SPE
(Silica) 정제 → 농축
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🔖 문헌
예시
- Törmä H. et al. Placenta
(1986).
→ 태반 homogenate에서
[³H]Retinol 분리 후 HPLC로 확인.
- SCCS 비타민 A 안전성 리포트에서 동일한 RP-HPLC 조건 활용됨.
✅ 3️⃣ Arachidonic Acid (PUFA)
🔬 HPLC 분석
조건 (대표)
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항목
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조건
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컬럼
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C18 역상 컬럼
(Phenomenex Luna C18(2), 4.6 × 250 mm, 5 μm)
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이동상
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A: Water + 0.1% H₃PO₄
B: ACN:MeOH (85:15, v/v)
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그라디언트
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0–30 min: 50% B → 100% B
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유속
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1.0 mL/min
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검출기
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UV 검출 (λ = 205
nm)
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파생화
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FAMEs 유도체화
(BF₃-MeOH, 60℃, 30분)
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전처리
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헥산 추출 → FAMEs → 정제 후 주입
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🔖 문헌
예시
- IGF-2 조절 지방산 논문 (Biol Reprod,
2005)
- 표준 PUFA HPLC는 Lipids, J Chromatogr A 표준 조건 인용.
✅ 4️⃣ 담즙산
(Hyodeoxycholic acid 등)
🔬 HPLC 분석
조건 (대표)
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항목
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조건
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컬럼
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C18 역상 컬럼 (Waters
XBridge C18, 4.6 × 150 mm, 5 μm)
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이동상
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A: 10 mM KH₂PO₄ (pH 2.5)
B: ACN
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그라디언트
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0–20 min: 30% B → 70% B
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유속
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1.0 mL/min
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검출기
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UV 검출 (λ = 210
nm) 또는 ELSD
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전처리
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SPE 정제, 담즙산 Na-salt로 전환
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Ion-pairing
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Sodium heptanesulfonate (0.005 M) 가끔
첨가
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🔖 문헌
예시
- Placental bile acid profiling, MDPI
IJMS (2023).
→ Human 태반 담즙산도 동일 방식 적용됨.
✅ 5️⃣ 저분자 펩타이드
🔬 HPLC 분석
조건 (대표)
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항목
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조건
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컬럼
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C18 역상 컬럼 (Vydac
C18, 4.6 × 250 mm, 5 μm)
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이동상
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A: 0.1% TFA in Water
B: 0.1% TFA in ACN
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그라디언트
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0–30 min: 5% B → 50% B
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유속
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1.0 mL/min
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검출기
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UV 검출 (λ = 220
nm)
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전처리
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Alcalase 처리 → 10
kDa 이하 ultrafiltration
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분석 특징
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분획별 RT 기록 → LC–MS
연동 가능
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🔖 문헌
예시
- Laosam et al. PLOS ONE
(2021).
→ 돼지 태반 가수분해물 펩타이드 HPLC 크로마토그램 수록.
감사합니다
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