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김민지님의 글의 답변 입니다.
문의주신 화장품과년 성분 분석은 우리원에서 하지 않습니다. 식품에 관한 식품공전에 등제된 시험을 하고 있습니다.
감사합니다.
김민지님의 글입니다.
>안녕하세요
물리화학적 성질 분석 및 성분 분석 가능 여부 문의드립니다. 물리화학적 성분 아래 내용에서 어떤 것들이 평가 가능할까요? 돼지태반 추출물은 분말 상태로 되어있습니다.
식약처 화장품 위해평가 보고서 작성을 위해 물리 화학적 성질 데이터가 필요합니다. [물질명, IUPAC명, CAS No., 화학식, 분자량, 순도(분석방법), 구조식, 물리적 성상, 녹는점, 끓는점, 밀도, 용해도, Log Pow, 헨리상수, 동의어] 성분분석 의뢰 내용은 다음과 같습니다. 전처리도 해주시는지 궁금합니다. 구체적 HPLC 분석 조건(컬럼/용매/검출기) 및 논문별 분리 크로마토그램 사례
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">✅ 1️Polyamines (Spermidine, Spermine)
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔬 HPLC 분석
>조건 (대표)
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> 항목
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> 조건
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> 컬럼
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> C18 역상 컬럼 (ex:
> Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18, 4.6 × 150 mm, 5 μm)
> | |
> 이동상(Mobile Phase)
> |
> A: 50 mM KH₂PO₄ (pH 6.8) + 5% ACN
> B: ACN:MeOH:Water (45:45:10)
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> 그라디언트
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> 0–10 min: 10% B → 70% B (선형)
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> 유속 (Flow rate)
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> 1.0 mL/min
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> 주입량
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> 20 μL
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> 검출기
> |
> FLD (형광 검출, ex:
> Ex 340 nm / Em 445 nm)
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> 파생화 시약
> |
> OPA (Ortho-Phthalaldehyde), FMOC-Cl
> (Fluorenylmethyloxycarbonyl chloride)
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> 전처리
> |
> 시료 내 polyamine은
> OPA/FMOC로 유도체화 (15분 반응) 후
> 주입
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔖 문헌
>예시
>
>
> - Wu G. et al. Biology of
> Reproduction (2005).
> → 돼지 태반 Proline → Putrescine/Spermidine 전환 경로
> 확인.
>
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">✅ 2️"Segoe UI Symbol"">⃣ Retinol (비타민 A)
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔬 HPLC 분석
>조건 (대표)
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> 항목
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> 조건
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> 컬럼
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> C18 역상 컬럼 (Waters
> Symmetry C18, 4.6 × 250 mm, 5 μm)
> | |
> 이동상
> |
> MeOH:Water (95:5, v/v) + 0.1% BHT (산화
> 방지)
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> 유속
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> 1.0 mL/min
> | |
> 주입량
> |
> 20 μL
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> 검출기
> |
> UV 검출 (λ = 325
> nm)
> | |
> 전처리
> |
> 헥산:EtOH 추출 → SPE
> (Silica) 정제 → 농축
> |
>
> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔖 문헌
>예시
>
>
> - Törmä H. et al. Placenta
> (1986).
> → 태반 homogenate에서
> [³H]Retinol 분리 후 HPLC로 확인.
> - SCCS 비타민 A 안전성 리포트에서 동일한 RP-HPLC 조건 활용됨.
>
>
>
>
> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">✅ 3️"Segoe UI Symbol"">⃣ Arachidonic Acid (PUFA)
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔬 HPLC 분석
>조건 (대표)
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> 항목
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> 조건
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> 컬럼
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> C18 역상 컬럼
> (Phenomenex Luna C18(2), 4.6 × 250 mm, 5 μm)
> | |
> 이동상
> |
> A: Water + 0.1% H₃PO₄
> B: ACN:MeOH (85:15, v/v)
> | |
> 그라디언트
> |
> 0–30 min: 50% B → 100% B
> | |
> 유속
> |
> 1.0 mL/min
> | |
> 검출기
> |
> UV 검출 (λ = 205
> nm)
> | |
> 파생화
> |
> FAMEs 유도체화
> (BF₃-MeOH, 60℃, 30분)
> | |
> 전처리
> |
> 헥산 추출 → FAMEs → 정제 후 주입
> |
>
> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔖 문헌
>예시
>
>
> - IGF-2 조절 지방산 논문 (Biol Reprod,
> 2005)
> - 표준 PUFA HPLC는 Lipids, J Chromatogr A 표준 조건 인용.
>
>
>
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">✅ 4️"Segoe UI Symbol"">⃣ 담즙산
>(Hyodeoxycholic acid 등)
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔬 HPLC 분석
>조건 (대표)
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> 항목
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> 조건
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> 컬럼
> |
> C18 역상 컬럼 (Waters
> XBridge C18, 4.6 × 150 mm, 5 μm)
> | |
> 이동상
> |
> A: 10 mM KH₂PO₄ (pH 2.5)
> B: ACN
> | |
> 그라디언트
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> 0–20 min: 30% B → 70% B
> | |
> 유속
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> 1.0 mL/min
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> 검출기
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> UV 검출 (λ = 210
> nm) 또는 ELSD
> | |
> 전처리
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> SPE 정제, 담즙산 Na-salt로 전환
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> Ion-pairing
> |
> Sodium heptanesulfonate (0.005 M) 가끔
> 첨가
> |
>
> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔖 문헌
>예시
>
>
> - Placental bile acid profiling, MDPI
> IJMS (2023).
> → Human 태반 담즙산도 동일 방식 적용됨.
>
>
>
>
> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">✅ 5️"Segoe UI Symbol"">⃣ 저분자 펩타이드
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔬 HPLC 분석
>조건 (대표)
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> 항목
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> 조건
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> 컬럼
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> C18 역상 컬럼 (Vydac
> C18, 4.6 × 250 mm, 5 μm)
> | |
> 이동상
> |
> A: 0.1% TFA in Water
> B: 0.1% TFA in ACN
> | |
> 그라디언트
> |
> 0–30 min: 5% B → 50% B
> | |
> 유속
> |
> 1.0 mL/min
> | |
> 검출기
> |
> UV 검출 (λ = 220
> nm)
> | |
> 전처리
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> Alcalase 처리 → 10
> kDa 이하 ultrafiltration
> | |
> 분석 특징
> |
> 분획별 RT 기록 → LC–MS
> 연동 가능
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> mso-bidi-font-family:"Segoe UI Emoji"">🔖 문헌
>예시
>
>
> - Laosam et al. PLOS ONE
> (2021).
> → 돼지 태반 가수분해물 펩타이드 HPLC 크로마토그램 수록.
>
>
> 감사합니다
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